WWW.MASH.DOBROTA.BIZ
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - онлайн публикации
 

«Тслегвиа Елаггеряээ Сергеевяя НССЛВДОВАНПЕ РОЛИ РАСПЮМЗМОГО FAS-РЩЕПТОРА В ПАТОГЕНЕЗЕ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ, Р1ШМАТОИДНОГО АРТРИТА Н СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКИ ...»

оозовзш

На правах рукопвся

Тслегвиа Елаггеряээ Сергеевяя

НССЛВДОВАНПЕ РОЛИ РАСПЮМЗМОГО FAS-РЩЕПТОРА В ПАТОГЕНЕЗЕ

АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ, Р1ШМАТОИДНОГО АРТРИТА Н СИСТЕМНОЙ

КРАСНОЙ ВОЛЧАНКИ

03.60.04 -Сяохиыва

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации в* сспсканве ученой стемия

кандидата биологических наук

МАЙ 2007 Пущ=ио2007 Работа выполвсаа в лаборатории генной инженерия НИИ молекулярной медицины ММА им. И М. Сеченова и в лаборатории клеточной инжверан Института тео;егичесюй и экспериментальной биофжшхи PAIL академик РАН и РАМН,

НАУЧНЫЕ РУКОВОДИТЕЛИ

док-гор медзциислп наук, профессор, Цальцеэ Мвхявл Алгв:аядрозич доктор биологических наук, Белецквй Игорь Петроовч ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ' доггер биологических ваук, профессор, Нявсселсв Владвмир ИБЕЯОЕЛЧ кандидат биологических наук, Неалепкво Владяижт Георгиевич ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ Научио-иссяедозгяельскяй институт ревматология РАМН Защита состоится «24» иза. 2007 г в 16.30 на заседании дкесергадкоиного совета Д 032.033,01 в Институте биофизики клетки РАН адресу 142290, Московпшя область, г.Пущиво, ул. Инстигутсга!, д 3, ИБК РАН С дяссертаовей можно ознакомиться в центральной бабшатске НЦБИ РАН, Пущиво Автореферат разослан «24» апреля 2007 года Ученый секретарь /Ъе*—* диссертационного совета, кандидат биологических наук 1М. Сыолихикз



ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

В регуляция пролиферации, днфференцировхи, клеточной гибели важную роль Еграяуг семейства рецепторов Фактора некроза опухоли (ФНО) и соответствующих лигавдов Часть этих функций реализуется в результате активации траясмембранных рецепторов лигандЕМи (растворимыми или трапсмембрапшага) и последующей передачи сигнала в клетку, которая несет рецептор Другие функции реализуются посредством так называемой «обратной сигнализации», при которой рецептор (растворимый или трансмембраиный) выполнит роль лиганда, а трансмембравный лигаяд внетупает в качестве рецептора. Практически для всех членов семейств ФНО-рсцепторов и ФНОлвпшдов показаны биологические эффекты «обратной сигнализации» на различных типах клеток .

Fas-рецептор в Fas-ляганд являются членами семейств рецепторов ФНО и лигапдов ФНО, соответственно, п играют ключевую роль в поддержании гомеостаза иммунной системы. Активация трансмембранного Fas-рецептсра Fas-липшдом летят в основе селекции Т- и В-лимфоцитов, уничтожения клеток-мишеней пдгготохекческими лимфоцитами. Активация трапемембраяного Fas-рецептора растворимым или трансмембранпым Fas-лигапдом в болышшетве случаев приводят к гибели клеток по типу апоптоза. Для системы Fas/FasL была также пгюдемоястряровапа возможность проведения обратного сигнала через трансмембранный FasL (Desbarals et a l, 1998, Suzuki, Fink, 2000; Prusakova et a l, 2003) .

Большое количество патогенных состояний, в честности аутоиммунных, связано с нарушением функционирования системы Fas/FasL Прн некоторых аутоиммунных заболеваниях, в том числе прн системной краевой волчанке (СКВ) и ревматоидном артрите (РА), уровень растворимого Fas-рецептора (sFas) в сыворотке крови больных повышен по сравнению со здоровыми допорзми (Cheng et aL, 1994; Christsnsson et a l, 2002; Ales et a l, 2004; Sabm et aL, 2007) Было сделано предполокенве о том, что «Fas конкурирует с ыембраино-связанным Рая-рецептором за связывание с лагандом и является ингибитором Раз-опосредованного апоптоза (Cheng et aL, 1994; Tokano et aL, 1996;



Hasunuma et a l, 1997) .

Однако в роботах других авторов показано, что увеличение уровня растворимого Fas-рецептора в сыворотке крови больных СКВ и РА коррелирует с количеством Епоптотических лимфоцитов (СооПвеу et al,1999, Smokwska et,si, 2003, Silvestas et al,

2003) Было обнаружено, что инкубация с sFas значительно подавляет пролиферацию Т клеток. Основываясь иа этих наблюдеипях, можно полагать, что sFas вызывает проапощщичесхий эффект Проапоптотическиг эффекты sFas, как было похаззно ранее, реализуются посредством «обратной сигнализации» через Fas-лнгаид В настоящей работе была предпринята попытка изучить возможную роль sFas, как индуктора Fes-лвтанд спосредовгнпой «обратной сигнализации» в патогесЕэе таких аутоиммунных заболеваний, как системная красная волчанка и ревматоидный артрит .

Псльиссдаяоватта Цель данной работы заключалась в исследовании роли растворимого Fas-рецептора в патогенезе ревматоидного артрита и системной красной волчанки .

Задачи ^исследования

1. Разработать тест-систему типа «сэндвич» иа основе монохдояальпых антител (МКА) для определения уровня sFas в сыворотке крови .

2. Проанализировать концеятрацию и форшу (одигомерная или мономерная) sFas в сыворотке крови болышх в срадшеяни со здоровыми донорами и выявить источник его экспрессия 3 Исследовать возможную корреляцию уровня «Fas в сыворотке крови с клиническими параметрами больных РА и СКВ для выяснения возможности использоваиия анализа sFas в целях диагностики и прогноза заболеваний .

4 Исследовать биологическую активность сывороток больных, содержащих высокий уровень растворимого sFas, на культуре клеток .

5 Выявить типы клеток - потенциальных мишеней для sFas у больных РА и СКВ Научная иовизн» и драстнчгскяд веяяость ра&угы, Впервые показано, что sFas, обнаруживаемый в сыворотке крови больных РА к СКВ в повышенной концентрации, предстазлея олнгоыерной формой и обладает цвтоюксическоЗ активностью .

Анти-пролифератнЕлах активность сывороток больных аутоиммунными заболеваниями, содержащих высокий уровень олигомериого aFas, наряду с высокими уровнями эхспрессяи Раз-лигаяда в сишгаиопитах и лимфоцитах периферической крови позволяют предполагать возможность Fas-липщд - опосредсванпой «обратной сигнализации» в патогенезе РА и СКВ Обнаружена корреляция между концентрацией «Fas и активностью заболевания, количеством болезненных и припухших суставоз у больных РА. Таким образом, sFas пожат рассматривала как маркер клинической акгивноста при РА, а твкяе иметь прогностическое знавне и испольэоваты а для мониторинга течения заболевания .

Показана взаимосвязь между уровнем sFas и наличием лейкопении, а также зысокой частотой ссрозитов, язн рогозой полости, поражения почет, суставов, иммунологических и гематологических нарушений у больных СКВ Т а и м образом, sFas может служить индшатороы повреждения органов и палей при СКВ Полученные результаты дают основание для поиска терапевтических средств, ингибирующих цитотоксичесхую активность sFas Апробация рябдты Материалы диссертационной работы представлены в ввде докладов в .



стендовых хюбщений на «окференциях: молодых ученых. «Виолопиг - наука XXI века* (Пущино, 2003), «Molecular Mechanisms in Homeostasis and Disease» (Спецес, Греция, 2003), «Молекулярная медицина и бкебезопасвость» (Москва, 2005); на 31-м конгрессе FEBS «Molecules ш Health вло" Disease» (Стамбу/, Турция, 2006) Публикации По теме диссе11тацни опубликовапс и находятся в печати 3 статьи и 2 тезисов конференций .

CTPYCTVIM Н обьеи диссертация Диссертация «стоит из введения, обзора литературы описание материашв и истодов нсследовавзя, изложения полученных результатов и ях обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы Работа изложена на страницах, включает таблицы и рисунков Список литературы включает ссылок

–  –  –

Периферические лимфоциты крови выделяла из геиаринязированпой венозной крови пациентов я здоровых доноров в соответствии с протоколом (Flat? Laboratories, США) .

Образцы синовиальной ткани получали во время артроскошга и сшовкапсулэктомнн, проведенных согласно показаниям, и замораживали при -70 С .

Анализ sFas в сыворотке крозя. Сыворотки с высоким содержанием sFas разделали на FPLC с помощью гельфил&трации на колонке с Snperose - 12 (Pharmacia, Швеция) Разделение проводили в буфере, содержащем 10 мМ Трие-HCL рН 7.4, 150 мМ Nad со скоростью ОД мл/мин, поглощение элюедта детектировали при 280 ЕМ .

Анализ экеврессвя траиемЕибрасиого FasL в евповвальвой ткаяв в лкмфоцвтах периферической хрсвя. Иммунщистхнмичесхук) реакцию проводила на серийных кряостатвых срезах синовиальной ткани толщиной 5 щп стандартным сгрептаявдинбиотиновым методом с использованием мотаклональных аптнтел к FasL (R&D Systems, USA). Метку выявляли с помощью днаминобснзидита (ЦАБ) (Sigma, USA). Срезы дополнительно окрашивали гематоксилином .

Иммунофлуоресцевтоое окрашивание лимфоцитов периферической крови проводила с помощью моноклональных антител к FasL (R&D Systems, USA). Первичные антитела выявляли вторичными антителами, мечеными FTTC (Sigma, USA) При интерпретации результатов учитывали интенсивность свечения .

Статистика. Статистическая обработка всех полученных данных прогедшхась с ншользоваянен велараметрнческих методов программы «Статистика 60» (Staisoft, США). Авшшэ корреляции концентрации sFes о клиническими параметрами проводился с исоольэованиеы коэффициента корреляция Спирмена (г). СяЯЯППМШ значимость показателей была определена как р0,05 .

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

1. Разработка тест системы типа «сзндввчи на «снаес моиоклпяадьных антител для переделами кошвсвтрапва iFa« а сыворотке крове .

Первый этап работы заключался в получении ыовоклокальных антител к растворимому Kas-репептору. Д м этого проводили гибридизацию клеток ыисдомы NSO с клетками селезенки мыши, иммувкзироаанвов рекоибкваиткьш растворимым Fasрецептором (FaaATM). Полученные гибрядрмы отбирались на селективной среде, содержащей гипоксаитин, амнноптерви и тимидин. Через две недели после процедуры гибридизации купьтуральвую жидкость анализировали ва содержание антител, специфичных к FasATM, методами иммувюферментвого анализа (ИФА). Были отобраны 4 клона, продуцирующие моноклинальные антитела (МКА) с высокой аффинностью к решмбизантному растворимому Fas-pener/ropy .

Для получения необходимого количества МКА клоны, продуцирующие специфические антитела к Fas-рецептору, переводили в асцитную форму, и МКА из асцвтной жидкости повторно тестировали с помощью ИФА (рве. 1) .

Рис. 1. Тестирование МКА (клоны 1, 2, 3, 4) из асцвтной жидкости методом ИФА. В качестве антигена наносили рекомбинантный FasATM. В качестве отрицательного контроля (К-) использовали рехомбинатный белой Вех. В качестве положительного контроля (К+) использовали сыворотку иммунизированной мыши в разведении 1:1000 .

i

–  –  –

P H C 2. Тестирование МКА из асцитной жидкости методом иммувоблотинга. МКА, продуцируемые клонами 1, 2, 3, 4, взаимодействуют с FasATM (~45кДа). В качестве автигена наносили лизат Е. coli, содержащий FasATM В хачестве отрицательного контроля использовали лизат клеток Е. coli, содержащий рекомбииаитиый белок Вс1-Х .

Затем МКА тестировали с помощью иммуноблотинга (рве. 2). Моиокпональные антитела, продуцируемые клонами 1, 2, 3,4, взаимодействовали с FasATM (молекулярная масса -45 кДа) .

После очистки МКА конъюгяровали с пероксидазой хрена и полученные ковыогаты проверяли в различных комбинациях с неконъюгироваяныыи МКА для подбора пар, узнающих различные эпигоны FasATM. В результате была выбрана пара МКА для «сэндвич» методики ИФА и подобраны оптимальные концентрации МКА и коныогата .

Концентрацию sFas в сыворотке крови определяли с помощью калибровочной кривой, отражающей зависимость оптической плотности при 490 нм от концентрации контрольного образца с известным содержанием рекомбинаятного FasATM .

2. Исследование концентрации sFas в сыворотке крови больных РА, СКВ • здоровых доноров, Ранее было показано, что для больных аутоиммунными заболеваниями характерно повышенное содержание sFas (Cheng et al., 1994; Christensson et a!., 2002; Sahin et al., 2007). Мы проверили уровень sFas в сыворотках больных РА и СКВ по сравнению со здоровыми донорами. Концентрация растворимого Fae-рецептора в сыворотках здоровых доноров составила 1,5*0,3 нг/мл. Было установлено, что высокое содержание sFas (превышающее контрольные значения в 2 и более раз) наблюдается у 11% больных РА, 10% больных СКВ (табл. 2) .

–  –  –

RT-PCR анализ мРНК, выделенной из лимфоцитов периферической крови, полученных от больных с повышенным уровнем eFas, показал резкое увеличение синтеза мРНК sFas по сравнению с больными с невысоким содержанием sFas и здоровыми донорами (рис. 3). Таким образом, ИСТОЧНИКОМ sFas в крови исследованных больных являются лимфоциты периферической крови .

–  –  –

Больные с высоким содержанием sFas (более Эпг/мл) имели 3 или 4 стадию заболевания по сравневию с остальными больными. Взаимосвязи между уровнем sFas и наличием ревматоидного фактора обнаружено не было (табл. 3) .

Таким образом, можно полагать, что sFas является маркером клинической активности при РА, может иметь прогностическое значение н использоваться для мониторинга течения заболевания и оценки эффективности проводимой терапии. Однако, sFas не может использоваться в качестве диагностического маркера, так как на ранних стадиях заболевания повышения уровня sFaj не было обнаружено .

–  –  –

Характерной чертой заболевания СКВ является усиленный алоптоз лнмфощггоз периферической крови, нейтрофилов и моноцитов (Emlea et a l, 1994, Courtney et al, 1999, Ren et aL, 2003) Так как иммуносупрессивная терапия влияет ва количество лейкоцитов, анализ корреляции между состоянием лейкопении (менее 4000 лейкоцитов в мм ) и уровнем sFas проводили у 42 больных, которые на момент исследования не получали кортикостерондной и цвтостатической терапии. Корреляционный анализ показал, что у таких больных высокий уровень sFas связан с низким числом лейкоцитов (г=-0,3, р0,05) Таким образом, можно полагать, что растворимый Fas-рецептор не является маркером клинической активности при СКВ, но может служит индикатором повреждения органов и тканей при данном заболевании .

4, Исследование структурных особенностей в дитотокягческой вктивпостп «Fas в сыворотке крови .

Ранее было показано, что рехомбинантный растворимый Fas-рецептор способен олигомеризоваться и в такой форме запускать клеточную гибель по типу ыюптоза в трансформированных линиях клеток путем активация трансмембранного Fas-ЛЕгвнда (Popoff et aL, 1999, Prusakova et aL, 2003) Мономернм форма не обладала цнтотокекчесхой активностью

–  –  –

Факт одигомеризацни рекомбинантиого растворимого Fas-рецептора позволял предполагать возможность существования естественных олигомеряьгх форм растворимого Fas-рецептора. Поэтому была проанализирована степень его олигомеризации в сыворотках пациентов, страдающих РА и СКВ. Для (того сыворотки разделяли с помощью гель-фильтрации, полученные фракции тестировали на присутствие Fas-рецептора, используя «сэндвич» модификацию иммуноферментного анализа (рис. 5) .

Оказалось, что в сыворотках пациентов с уровнем экспрессии растворимого рецептора, превышающим контрольные значения в 2-5 раз. основная часть Fas-антигена находится в высокомолекулярных фракциях (150-200 кДа). В сыворотках здоровых людей растворимый Fas был представлен исключительно мономерной формой .

Причины олиюмеризации остаются неясными. Возможно, спонтанная самоассоциация растворимого Fas-peueinopa происходит за счет взаимодействия участков экстраклеточной части Fas-рецснтора, ответственных за самоассоииацию рецептора (PLAD) .

или «доменов смерти» при высоких концентрациях (Boldin et al., 1995; PapotTet al., 1999;

Siegelctal.,2000) .

Поскольку рекомбинантный Fas в олигомерной форме проявлял цитотоксичность .

была проверена цитотоксическая активность отдельных сывороток больных, содержащих олигомеризованный sFas в высокой концентрации. Добавление 20% сыворотки пациентов .

содержащих высокий уровень sFas, к культуре клеток приводило к подавлению их пролиферации. Причем нрединкубация сывороток с нецитотоксичсским препаратом растворимого FasL. способного связываться с Fas-рецептором, заметно снижала этот эффект .

В то же время инкубация клеток с сыворотками здоровых доноров приводила к усилению пролиферации, и препарат Fast не влиял на пролиферацию клеток (рис. 6) .

Рис. 6. Сыворотка больных РА с высоким уровнем sFas подавляет пролиферацию клеток .

Клетки HeLa инкубировали в течение 24 часов с добавлением 20% сыворотки больных РА с высоким уровнем sFas (1-3) и здоровых доноров (4-6) в отсутствии ({J или присутствии (0) препарата нецитотоксичного растворимого FasL-FLAG. Пролиферацию клеток оценивали С помощью окрашивания красителем нейтральным красным. Жизнеспособность контрольных клеток принимали за 100%. Показаны типичные результаты одного из четырех экспериментов., Таким образом, сыворотки больных, содержащих sFas в высокой концентрации, обладают цитотоксической ак1ивностью, обусловленной, но крайней мере отчасти, олигомерным sFas .

5. Выявление типов клеток - потенциальных мишеней для sFas у больньп РА и СКВ .

Наличие биологической активности сывороточного sFas стимулировало поиск клеток

- потенциальных мишеней для sFas. Характерной чертой заболеваний РА и СКВ является повышение уровня апоптоза лимфоцитов периферической крови, а в нашем исследовании уровень sFas коррелировал с наличием лейкопении у больных СКВ .

Дпя проверки возможной роли sFas в гибели лимфоцитов больных было исследовано влияние сыворотки больных на первичную культуру лимфоцитов. При добавлении к первичной культуре лимфоцитов 20%-ой сыворотки здоровых доноров, в качестве контроля, и больных РА наблюдался цитотоксический эффект, который был значительно выше во втором случае (рис. 7) Добавление сыворотки больных РА с высоким уровнем sFas к первичной культуре лимфоцитов вызывало гибель клеток, а прединкубация сывороток с нецитотоксическим препаратом растворимого Fas лиганда снижала этот эффект .

Цитотоксический эффект при прединкубации контрольных сывороток с препаратом растворимого FasL не изменялся ММ 1 2 3 4 Рис. 7. Лимфоциты пациентов инкубировали с 20% сывороткой больных РА с высоким содержанием растворимого Fas-рецептора (2 и 4) н сывороткой здоровых доноров (1 и 3) в отсутствии (В) или присутствии (4Т) препарата нецитотоксичного растворимого FasL-FLAG .

Для оценки жизнеспособности клеток использовали МП-тест. Жизнеспособность клеток, обработанных сывороткой здоровых доноров, принимали за 100% Показаны типичные результаты одного из четырех экспериментов .

И Известно, что прн "обратной сигнализации" в качестве авдсгггорпой молекулы, опосредующей действие sFas, выступает треясыеы бранный FasL Поэтому была исследована экспрессия трансмембракного FasL в лимфоцитах периферической крови больных РА и СКВ с высоким уровнем sFas. Иммунофдуоресцентный авалю лимфоцитов крови таких больных показал, что значительна» честь клеток несет на поверхности трансмембранный FasL и подвергается апоптозу (рис. 8 а, б) .

Таким образом, гибель лимфоцитов прн активной форме исследованных аутоиммунных заболеваний, но крайней мере отчасти обусловлена олигомерным gPas .

Рас. 8. Лимфоциты больных с высоким уровнем sFas в сыворотке крови эхепрессируют трансмембранный FasL и подвергаются апоптозу: а) иммунофлуоресцентиое окрашивание лимфоцитов периферической крови с антителами к FasL. Стрелками обозначены FasLпоэитивяые клетки, б) Флуоресцентный анализ апоптотических клеток с помощью окрашивания Dapi. Стрелками показаны клетки, экспресснрующнс транснембранный FasL, с характерными для погибающих клеток конденсированными ядрами (увеличение 400 х) .

»

/ / 1

–  –  –

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоят ей работе была проэерена возможность Fas-лигаид - опосредованной «обратной сигнализации» в патогенезе аутоиммунных заболеваний, РА и СКВ .

Полученные данные, а именно повышенное содержание sFas в сыворотках крови больных РА и СКВ, анти-пролифэ)ативная активность сывороток, обусловленная одигомерным sF.is, и высокие уровни экспрессии трагемембранного Fas-лнганда в енновиоцитах и яамфощггах периферической крови позволяют предполагать возможность Fas-лнганд - опосредованной «обратной сигнализации» в шггогепеээ таких аутоиммунных заболеваний. Кроме того, известные дишые о повышенном содержании sFas в сыворотке больных другими аутоиммунными заболеваниями, в частности атн-фссфш!кпидвым синдромом и множественным езелерооом (Dowhng et al., 1996; PUtoiu et al., 2СОЗ), дают основание ползп.ть, что активация sFas - зависимой «обратной сиптализашго» может выступать в качестве общего механизма развития аутоиммувных патологий Результаты работы указывают на необходимость более внимательного изучения молекулярных механизмов действия существующих терапевтических подходов, направленных та модификацию фуЕкдионирования системы Fas/FasL. Так, эффекты метаплопротеазы, расщепляющей мембрано-связанный F*sL, и ее ингибиторов можно рассматравать с точки зрения «обратной сигнализацию» BIK процессы, обеспе*оешающне или препятствующие проведению сигнала через траЕслсы&згкный FasL. Терапаггическвс эффекты Fas-яигвяда или faomamzee антител к Газ-антигену, описанные с случаях артритов, также могут быть объяснены не только за счет аггавации Разчиосредованного апоптоза, но и йнгибирования Fas-лигаяд - опосредованной «обратной сятаишзации»

(Matsuno et al, 2032; Ning et aL, 2004)

–  –  –

ВЫВОДЫ

1. Разработана тест-система на осшве мовохлональных антител ДЛЯ определения уровня растворимого Pas-рецептора в сыворотке крови .

2. Концентрация растворимого Раз-рецептора в сыворотках здоровых доноров составляет 1,5±0,3 нг/мл Примерно у 10% исследованных пациентов с подтвержденным диагнозом РА и СКВ наблюдается повышенное содержание «Fas в сыворотке крови Сдо 10 игЛсл) Источником растворимого Fas-рецептора в кроля таких больных являются периферические лимфоциты кровн 3 Высокий уровень растворимого Fas-рецептора в сыворотках больных РА н СКВ коррелирует с активностью аутоиммунного процесса. Анализ растворимого Fasрецептора кокет иметь прогнастическог значение в использоваться для мониторинга течения РА, а тайге может служить маркером повреждения органов я тканей при СКВ .

4. Растворимый Fas-рецептор в сыворотке крови больных РА и СКВ существует преимущественно в олигомерной форме и способен вызывать гибель трансформированных клеток HeLa и первичной культуры лимфоцитов .

5 Высокий уровень экспрессии Fas-янганда в синовиопитах и лимфоцитах периферической крови, а также высокий уровень sFes в сыворотке позволяют предполагать возможность Fas-лигевд - опосредованной «обратной сигнализации»

в патогенезе аутоиммунных заболеваний

1. Proussakova O.V., Rabaya N.A., Moshnifcova АЛ., Teleyma E.S,. Toranov A, Nanazashvili M.G, Beletsky LP Oligcrcerizauon of soluble Fas antigen induces its cytotoxicity J Biol Chem 2003, v 278. № 38, p 36236-36241 .

2 Прусакоиа OS, Ребая Н А, Мопишкоаа AJ3, Телегина B.C.. Белецкий И. П Цитотоксвческая активность растворимого Fas-рецепторз, Молекулярная медицина. 2005, № 2, стр. 33-41 .

П 3 Тсдепшя B.C. Решетяяк ТМ. МолшиЕова AJ5, Прусачова О В, Кузвецоза А.В, Изапов АЛ., Белецкий И.П., Пальцев МЛ. Возмогшая роль Fas-Jisroatодосредовагшой «обратной сигнализации в патогенезе системной красной волчанки Молекулярная медицина. 2008, №1 (в печати) 4 Телегина Е С. Жукова А Л, Белецкий И.П Разработка тест-системы для диагностика растворимого Fas-рецептора в сыворотке крова. Биология - наука XXI века, Пущяяо, ОНТИ ПШД РАН, 2003, стр. 380-381 .

5 Trizna JJi.. Tetejriaa E S.. Popovieh К Л • R&bava гГЛ.. Pronssalaova О V. FAS-liftandmediated "reverse signalling" in autoimmunity, tie possible impact The FEBS Journal .

2006, v. 273, № l, p 117 .

Отпечатано: ИЛА. А. Кулаков, г. Серпухов, Борисовское шоссе, 18, тел.: 8-915-200-86-98, 39-11-20 Подписано в печать:20.04.2007 г. Тираж 100экз .






Похожие работы:

«Приложение к основной образовательной программе основного общего образования Рабочие программы по учебному предмету Биология 8-9 класс Составитель: учитель биологии Дуброва Валентина Гурьевна МБОУ "ЯншиховоЧллинская СОШ" ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА. Биология как уч...»

«2.4. Экологический мониторинг (ФГУНПП "Росгеолфонд") Проведение государственного экологического мониторинга уникальной экологической системы озера Байкал предусмотрено статьей 20 Федерального закона о...»

«Программа учебной дисциплины Б1.Б.01. История Рекомендуется для направления подготовки: 44.03.05 Педагогическое образование (профили: "Биологическое образование, Географическое образование", "Образование в области безопасности жизнедеятельности, Физкультурное образование", "Химическое образование, Биологическое обра...»

«Костевич Валерия Александровна ИЗУЧЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МЕХАНИЗМОВ АНТИГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЛАКТОФЕРРИНА 03.01.04 – Биохимия Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Соколов...»

«Journal of Siberian Federal University. Engineering & Technologies 8 (2014 7) 976-983 ~~~ УДК 528.8.854, 528.77 Analysis of the Seasonal Dynamics of Vegetation on Remote Sensing Data Elena V. Fedotova*а,b, Artem A....»

«"Органическое сельское хозяйство. Состояние отрасли и перспективы" Председатель Правления Союза органического земледелия Сергей Коршунов При использовании информации ссылка на Союз органического земледелия обязательна Союз органического з...»

«А К А Д Е МИ Я Н А У К С С С Р СИБИРС I-Ю Е ОТДЕЛЕНИЕ ТРУДЫ ИНСТИТУТА ГЕОЛОГИИ И ГЕОФИЗИКИ выпус к 431 • DEMY O F S C I EN C E S OF Т Н Е U S S R AC A SIВE R IA BRA N NCH ТНЕ T RANSACTIONS O F INSTITUTE OF GEOLOGY AND GEOPHYSICS 1 s s u е 431 ENVIRONlVIENT AND LIFE IN ТНЕ GEOLOGICAL РAST • PROBLEMS OF E...»




 
2019 www.mash.dobrota.biz - «Бесплатная электронная библиотека - онлайн публикации»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.